肝内胆管癌（iCCA）作为第二常见的原发性肝癌，具有高度侵袭性和极差的预后表现，尤其在亚洲地区发病率居高不下。在2025年第19届国际肝癌协会年会（ILCA 2025）上，复旦大学附属中山医院高强教授在主题报告中，结合团队在这一领域的研究进展，系统阐述了KRAS突变iCCA的分子机制、肿瘤微环境特性及创新治疗策略，为这一难治性疾病的精准医疗提供了新的方向。
编者按：肝内胆管癌（iCCA）作为第二常见的原发性肝癌，具有高度侵袭性和极差的预后表现，尤其在亚洲地区发病率居高不下。在2025年第19届国际肝癌协会年会（ILCA 2025）上，复旦大学附属中山医院高强教授在主题报告中，结合团队在这一领域的研究进展，系统阐述了KRAS突变iCCA的分子机制、肿瘤微环境特性及创新治疗策略，为这一难治性疾病的精准医疗提供了新的方向。
肝内胆管癌的流行病学负担与诊疗现状
肝内胆管癌虽然仅占肝脏质量的3%，但其恶性程度高、治疗效果差，成为肝脏外科领域的重要挑战。流行病学数据显示，iCCA在原发性肝癌中的发病占比为10%-15%，在中国、日本、韩国等东亚国家发病率显著高于西方国家，这与地域环境、生活习惯和遗传因素密切相关。临床上面临早期诊断率低、手术切除率低、缺乏有效靶向药物和免疫治疗手段等多重困境，导致患者五年生存率不足40%。
高强教授团队研究发现，通过采用PET/CT技术，术前准确分期率从60.1%提升至71.8%，为手术方案的制定提供了更精确的依据[1]。
复旦大学附属中山医院的研究团队通过十年临床数据分析发现，iCCA患者术后生存状况不容乐观。2013-2017年间五年总生存率（OS）仅为38.2%，而五年无复发生存率（RFS）为41.2%，这一数据显著低于肝细胞癌的预后表现。
图1.中山医院iCCA患者术后生存情况
（引自讲者会议幻灯）
KRAS突变的分子特征、信号通路调控、肿瘤微环境调控
高强教授团队研究发现，在iCCA中，KRAS突变的发生率约为17%，与FGFR2突变呈现互斥现象，这一发现为分子分型提供了重要依据[2]。高强教授团队研究表明，大多数KRAS突变在iCCA中呈现克隆性分布特征，提示其在肿瘤发生过程中发挥关键驱动作用[3]。从分子机制角度看，KRAS主要通过RAS-RAF-MEK-ERK MAPK信号通路和PI3K-AKT-mTOR通路传导信号，其中第2外显子12和13密码子的复发突变使KRAS蛋白维持在持续激活状态[4]。
大规模基因测序发现，不同KRAS变异亚型与患者预后密切相关。G12型变异与不良预后显著相关，其中G12V变异患者的生存期最短，这为预后判断提供了分子标志物[5]。国外研究显示，KRAS突变分布具有肿瘤类型特异性，在胰腺癌、结直肠癌、非小细胞肺癌等不同肿瘤中突变频率各异，提示其在不同组织环境中的功能可能存在差异[6]。
随着KRAS靶向药物的快速发展，针对不同突变亚型的抑制剂不断涌现，但耐药问题日益凸显[7]。MRTX-1133作为强效、选择性KRASG12D抑制剂，其晶体结构研究为药物优化提供了重要线索[8]。然而，肿瘤细胞通过Kras、Yap1、Myc、Cdk6等基因扩增以及药物外排泵Abcb1a/b的上调等多种机制产生耐药，这为联合治疗策略提出了新的挑战[9]。
高强教授团队研究发现，KRAS突变导致其表达显著上调，与炎症免疫、细胞外基质黏附和碳代谢通路中mRNA/（磷酸化）蛋白水平增加相关。此外，高强教授团队研究发现，KRAS突变可调控免疫微环境，表现为增加中性粒细胞，减少淋巴细胞水平[3，10]。肿瘤微环境分析显示，KRAS突变与髓系炎症反应密切相关。近半数炎症亚型肿瘤携带KRAS突变，基因集富集分析（GSEA）提示中性粒细胞脱颗粒是KRAS突变相关的最主要通路[10]。机制研究表明，KRASG12D在iCCA细胞中的异位表达可显著上调COX-2、COX-1表达水平，并增加前列腺素E2（PGE2）的合成，这为炎症微环境的形成提供了分子基础[10]。
高强教授团队研究发现，IL1RN-201/203转录本的上调在KRAS突变iCCA中发挥重要的抗炎作用。阿那白滞素（Anakinra）作为IL-1受体拮抗剂，能够重塑KRAS突变iCCA的免疫微环境，并显著延长模型动物的生存期[11]。阿那白滞素增强抗PD-1疗法对KRAS突变型iCCA的疗效；荧光原位杂交（FISH）检测表明，PD-1治疗应答组（R）中IL1RN-201/203表达水平显著升高[11]。从作用机制来看，IL1RN通过竞争性结合IL-1受体，有效阻断IL-1信号通路的活化[12]。
KRASG12D抑制能重编程肿瘤微环境，例如在胰腺导管腺癌中，MRTX1133可逆转早期和晚期肿瘤生长，并通过诱导FAS促进CD8+T细胞介导的死亡[13]。三重免疫联合方案（CXCR1/2抑制剂SX-682、抗LAG3抗体、激动性抗41BB抗体）与KRAS抑制联用，在自体胰腺导管腺癌模型中诱导了持久的治疗反应[14]。2025年美国临床肿瘤学年会（ASCO）大会上发布的临床研究数据表明，KRASG12C抑制剂奥洛莫拉西布（olomorasib，LY3537982）与PD-1抑制剂帕博利珠单抗联合使用，对于存在KRAS基因G12突变且PD-L1的TPS评分大于50%的未经系统治疗的非小细胞肺癌，治疗应答率达到77%，展现了良好的应用前景[15]。
图2.KRASG12C抑制剂与抗PD1单抗联合使用的疗效结果
（引自讲者会议幻灯）
高强教授团队最新发表的研究显示，KRAS突变通过PI3K-AKT-mTORC1-HIF1α信号轴调控SLC16A3表达，进而驱动糖代谢-表观遗传重编程进程，促进iCCA的恶性进展[15]。研究发现SLC16A3 S436位点的磷酸化水平与患者不良预后显著相关，其磷酸化状态受到CK2激酶的精确调控[15]。CK2抑制剂CX-4945能够有效抑制iCCA进展，这为靶向代谢重编程提供了新的治疗思路[15]。
新抗原筛选与个体化免疫治疗
高强教授团队前期工作证实，源自KRASG12D的肽段LVVVGADGV与HLA-A*02:01具有高亲和力，并显示出强免疫原性[3]。通过T细胞共培养实验和流式细胞术分析，发现LVVVGADGV（KRASG12D）肽段能够有效激活特异性T细胞反应。结合蛋白质组学分析和MHC结合预测，研究人员将突变KRAS肽段鉴定为具有潜力的公共新抗原[16]。
相关研究成功筛选出4个靶向KRASG12D的T细胞克隆型，经基因工程改造的自体T细胞治疗显示出强大的抗肿瘤活性，在临床观察中实现肺转移灶的客观消退[17，18]。基于新抗原研究的深入，G12D/R肽疫苗在KRAS突变肿瘤模型中展现出显著的治疗效果。高强教授团队开展的多组学特征分析揭示，TP53/KRAS共突变iCCA患者预后最差，其肿瘤组织中细胞黏附相关分子（ITGB6、CDH3、CLDN18）表达显著上调，这些分子可能通过整合素-FAK-SRC信号通路促进肿瘤的转移和进展[2]。
针对CLDN18.2的抗体药物偶联物（ADC）联合免疫检查点抑制剂的治疗方案在晚期胆道癌中显示出良好前景。高强教授团队研究开展的卡度尼利单抗（PD-1/CTLA-4双特异性抗体）与LM-302（CLDN18.2 ADC）的Ⅱ期多中心临床试验数据显示，10例患者中4例达到客观缓解，客观缓解率为40%。该研究仍在持续中。
图3.卡度尼利单抗与LM-302的Ⅱ期多中心临床研究
（引自讲者会议幻灯）
技术创新方面，高强教授团队最新发表研究显示，邻近标记技术实现10-30倍荧光信号增强，PATCH技术平台有效驱动T细胞活化并防止其耗竭，在体内诱导强效的T细胞免疫应答[19]。通过CRISPR筛选技术，高强教授研究团队鉴定出ATP酶VCP作为新的可成药靶点[20]。VCP抑制剂CB-5339通过诱导细胞衰老有效抑制胆管癌增殖，基于此开发的“一二连击”策略（“one-two punch”strategy）——先诱导肿瘤细胞衰老，再通过衰老细胞清除疗法消除肿瘤细胞，为胆管癌治疗提供了新的思路。
图4.针对KRAS突变iCCA的新型治疗策略小结
（引自讲者会议幻灯）
总结与展望
针对KRAS突变iCCA的精准治疗策略主要包括四个方向：通过CK2抑制剂Silmitasertib和PYGB抑制剂卡维地洛调控代谢和表观遗传重编程；采用抗炎药物联合PD-1抑制剂或特异性抑制剂联合免疫治疗调节髓系炎症和淋巴细胞浸润；基于KRAS突变衍生新抗原开发过继细胞治疗和肿瘤疫苗；利用T细胞衔接器或CAR-T技术靶向KRAS相关表面抗原，以及ADC药物联合免疫治疗。
复旦大学附属中山医院研究团队通过系统的转化研究，建立了KRAS突变iCCA的分子分型体系，阐明了肿瘤微环境的免疫调控机制，开发了多种创新治疗策略，为这一难治性疾病的精准医疗提供了重要的理论和实践基础。随着对KRAS信号网络和肿瘤微环境相互作用机制的深入理解，以及新型治疗技术的不断发展，iCCA的临床治疗前景将更加广阔。
参考文献
[1].Lin YP，…Gao Q*.HepatoBiliary Surg Nutr 2022
[2].Dong LQ，….，Gao Q*，Gao D*，Zhou H*，Fan J*.Cancer Cell 2022
[3].Lin YP，…Gao Q*.Cancer Discov 2022
[4].Singhal A，et al.Nat Med 2024
[5].Zhou SL，et al.JAMA Surg 2022
[6].Hofmann et al.Cancer Discovery 2022
[7].Isermann T，et al.Trends Cancer 2025
[8].Hallin J，et al.Nat Med 2022
[9].Dilly J，et al.Cancer Discov 2024
[10].Lin J，…Gao Q*.J Immunother Cancer 2022
[11].Zhang M，…Gao Q*.Cancer Discov.2023
[12].Bram V，et al.Frontiers in Immunology.2021
[13].Mahadevan KK，et al.Cancer Cell 2023
[14].Liu Y，et al.Cancer Discov 2025
[15].Chen R，…Gao Q，Gao DM*.Cancer Res.2025
[16].Savage SR，…Gao Q*，Zhang B*.Cell 2024
[17].Tran E，et al.N Engl J Med 2016
[18].Leidner R，et al.N Engl J Med 2022
[19].Li S，…Gao Q*，Han S*.Nature 2025
[20].Yang W，…Gao Q*，Jin H*.PNAS 2025
高强教授
主任医师、教授、博导
复旦大学附属中山医院
院长助理、肝胆肿瘤和肝移植外科主任
中国临床肿瘤学会肝癌专业委员会常务委员兼秘书长长江学者“特聘教授”、万人计划、国家优青中国医师协会外科分会肝胆青年工作组组长中国病理生理学会免疫分会青委会主任委员中国人体健康促进会细胞免疫治疗专委会副主任委员国家癌症中心肝癌质控专委会委员兼秘书中国抗癌协会青年理事会理事上海市抗癌协会青年理事会副理事长上海市抗癌协会转化医学分会副主任委员主持国家科技重大专项，国自然重大研究计划、重点项目、国合重点等多项课题。以第一或通讯在Cell、Science、Cancer Cell、Cancer Discov、J Clin Oncol、Ann Oncol等发表多篇论文。
京公网安备 11010502033352号